離子交換色譜是指離子交換色譜中的固定相中的一些帶電荷的基團(tuán),這些帶電基團(tuán)通過(guò)靜電相互作用與帶相反電荷的離子結(jié)合。如果流動(dòng)相中存在其他帶相反電荷的離子,按照質(zhì)量作用定律,這些離子將與結(jié)合在固定相上的反離子進(jìn)行交換。
離子交換色譜柱采用薄膜無(wú)孔核顆粒,能以高分離度和柱效分離蛋白變體,解析僅有單個(gè)帶電荷殘基差異的異構(gòu)體。
分離原理:
使用表面有離子交換基團(tuán)的離子交換劑作為固定相。帶負(fù)電荷的交換基團(tuán)(如磺酸基和羧酸基)可以用于陽(yáng)離子的分離;帶正電荷的交換基團(tuán)(如季胺鹽)可以用于陰離子的分離。不同離子與交換基的作用力大小不同,在樹脂中的保留時(shí)間長(zhǎng)短不同,從而被相互分離。
離子交換色譜柱的優(yōu)點(diǎn)是:
1、具有開放性支持骨架,大分子可以自由進(jìn)入和迅速擴(kuò)散,故吸附容量大。
2、具有親水性,對(duì)大分子的吸附不大牢固,用溫和條件使可以洗脫,不致引起蛋白質(zhì)變性或酶的失活。
3、多孔性,表面積大、交換容量大,回收率高,可用于分離和制備。